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上海千實解讀色譜分離度的確定

  在具體分析工作中,色譜分離度究竟確定多大才好,視樣品要求及定量方法不同而異。根究上文討論的原則,結合實際情況選擇固定液、柱長、載氣線速度和柱溫等條,使各參數符合所需分離度的要求。
  1、兩個不等面積色譜峰欲分離到不同純度時所需的理論板數
  對二交疊且不等面積的二色譜峰,則會產生相互干擾,此時分離不同純度的n需要值可從,關系圖中可以查的(事先確定R值),關系圖中n為雜志組分與主組分的比值,n1=△a/2a1,n2=△a1/a2;A1組分1峰面積百分數:;A2組分峰面積的百分數:;A1+A2=1;當A1≠A2時,n值需乘以歸一化因子。
  2、不同定量方法,不同雜質含量時對R值的要求
  此情況對分離度要求顯然不同,若二組分色譜峰交疊,采用峰面積定量,常用相交點中切法,可不比考慮組分的純度影響。因此種狀況二峰互為混入他峰雜質,所以只知二者綜合后對面積定量的影響即可。如果采用峰高定量時,只需峰頂點無其他組分干擾便可,對R值要求顯然要低得多,對一個具體任務而言:
  2.1提出分析誤差(EA)的要求;
  2.2初試驗測出難分二組分峰高比Φ值;
  2.3通過誤差函數計算出R1/2或R值來,其定量分析誤差EA與R1/2,φ之間的關系為:
  依此可求得當EA≤1%時,不同含量(φ值不同)所要求的達到的R1/2值(R值),可見下表。

  不同定量方法當含量變化時對R值的要求

  當用峰高定量時,定量誤差Eh與R1/2,φ值間的關系為:

  進而可以求出當EA≤1%時,不同含量(φ值不同)所要求達到的R1/2。
  以上討論及表列出的數據系指正常柱負荷范圍內。對痕童分析,φ值過大,試樣量大,主峰掩蓋雜質峰(例如大量組分中的微量高沸點雜質峰),此時的分離要求很高的R值(大于正常柱負荷時R值的幾倍或十幾倍),如果色譜系統達不到要求,則需要全部改選恒量分析條件。