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上海千實精密機電有限公司:疏水色譜的原理和應用

工廠簡介:

上海千實精密機電科技有限公司成立于2012年,專注于研發、設計及生產紡織、汽車內外飾件、塑料、纖維、氣候老化、燃燒類等測試儀器,為學術研究單位及檢測機構提供紡織測試儀器和服務,上海千實是目前國內較有競爭力和研發實力的紡織檢測儀器廠家之一,研發團隊由一群經驗豐富的工程師組成,我們本著全心全意為客戶服務,努力推動材料物理性能檢測儀器技術革新而努力。

  疏水色譜是利用樣品分子與固定相的疏水力作用的不同,用流動相洗脫時,各組分遷移速度不同而達到分離的目的。流動相一般為pH 6-8的鹽水溶液,具有對蛋白質的回收率高,蛋白質變性可能性小等優勢。由于流動相中不使用有機溶劑,也有利于蛋白質保持固有的活性。

  疏水作用色譜是在高離子強度的條件下,蛋白質溶解度降低,易吸附在中等疏水性的填料表面。隨著離子強度的降低,蛋白質的溶解度增加,逐步從柱子上洗脫下來。該法具有高分辨率及保持蛋白質生物活性的特點。

  疏水作用色譜的固定相表面為弱疏水性基團,它的疏水性比反相色譜用的固定相低幾十到幾百倍,而流動相為高離子濃度的鹽溶液。蛋白質分子在這樣的固定相和流動相中進行分配,蛋白質分子上的疏水性基團和固定相的疏水基團作用而被保留。當用流動相洗脫時逐漸降低流動相的離子強度,洗脫能力增強。利用被分離組分分子表面的疏水微區、(可逆)變性后暴露出的疏水殘基,或在高鹽環境下暴露于分子表面的疏水殘基與固定相的疏水性 配體之間的作用強弱,依次用從高至低離子強度洗脫液可將疏水作用由弱到強的組分分離開。蛋白質分子按其疏水性大小被依次洗脫出來,疏水性小的先流出。在這樣的高鹽水溶液中,蛋白質不會失活。高濃度鹽與水分子發生強烈作用,導致疏水分子周圍形成空穴的水分子減少,促進疏水性分子與介質的疏水配基之間發生結合。這種疏水作用的大小取決于固定相和溶質的極性、流動相的組成和濃度。由于各種蛋白質表面氨基酸殘基極性不同,因此有可能通過改變固定相的極性和流動相的組成使蛋白質得到分離。

  疏水層析的原理完全不同于離子交換層析或凝膠過濾層析等技術,使該技術與后兩者經常聯合使用來分離復雜的生物樣品。目前該技術主要應用領域是在蛋白質的純化方面,成為血清蛋白、膜結合蛋白、核蛋白、受體、重組蛋白等,以及一些藥物分子,甚至細胞等分離時的有效手段。

公司簡介:

標準集團(香港)有限公司作為一家集研發、制造、銷售、培訓、服務于一體的現代技術企業,分公司是上海泛標紡織品檢測技術有限公司,負責銷售業務,生產工廠是上海千實精密機電科技有戲公司,負責產品加工生產售后,致力于將更多檢測儀器輸送市場,提供紡織類、皮革類、燃燒類、汽車內外飾件、材料環境氣候老化等等物理性能檢測儀器,更可接受非標定制,購買前均可按照客戶的要求進行針對性試驗,確保所購儀器適用。