pcr法檢疫鑒定病菌的標準
上海千實精密機電科技有限公司行業資訊:據悉,馬鈴薯斑紋片病菌檢疫鑒定方法已經被列為2019-2021年度國家市場監督管理總局國家標準制定項目,其計劃編號為20190932-T-469。為了制定出切實可行的標準,在標準研制之初,廣州海關技術中心、上海海關、滿洲里海關技術中心、銀川海關技術中心等收集了大量國內外有關馬鈴薯斑片病菌的有關資料,尤其是對該病菌的分布、寄主、生物學特性、分子生物學特性、檢驗方法、新研究發展等進行了全面、細致的了解。
以分子生物學實驗室獲得的結果作為標準制定的堅實基礎,起草組按照GB/T 1.1-2020《標準的結構和編寫規則》的要求和格式進行了標準的起草工作。目前,《馬鈴薯斑紋片病菌檢疫鑒定方法》已經編制完成,正面向社會征求意見。
《馬鈴薯斑紋片病菌檢疫鑒定方法》征求意見稿規定了馬鈴薯斑紋片病菌的pcr、巢式pcr及實時熒光pcr檢疫鑒定方法,適用于馬鈴薯、番茄、辣椒等茄科植物,以及胡蘿卜、芫荽、芹菜等傘形花科植物的種子、種苗、塊莖、塊根等植物材料以及傳播介體木虱中馬鈴薯斑紋片病菌的檢疫鑒定。
閱讀征求意見稿后可知,標準中規定的方法原理是馬鈴薯斑紋片病菌目前還無法培養,因此主要以分子生物學特征為本標準鑒定方法的主要鑒定依據。標準征求意見稿中也規定了實驗需要用到的儀器設備有熒光定量pcr儀、pcr儀、核酸分析儀、超凈工作臺、電泳儀、凝膠成像分析儀、研磨機、臺式小型離心機、制冰機、常規冰箱、旋渦震蕩器、微量進樣器、電子天平、水浴鍋、純水儀、高壓滅菌器、超低溫冰箱等。
樣品的采集在實驗中或多或少的會影響檢測結果。為了更好地進行實驗分析,標準中還規定了對于植株樣品要同時采集有癥狀和無癥狀的葉片和/或莖,從有癥狀的植物上取3-5片植物葉片和/或莖,無癥植物上不同部位取5-10片葉子和/或莖。在進行提取之前,還要對材料進行二次取樣,以保證材料包含較多的維管束組織,且植物樣品還要用研磨儀或液氮進行研磨處理。
經過多番試驗和檢測發現,本標準規定的方法具有操作簡便、靈敏度高、準確性高等優點。作為一項符合相關法律法規要求,有助于相關法律法規的落實和執行的技術執法支持,本標準將作為推薦性標準實施。也希望眾單位能在仔細研核后提出建設性意見,為標準的進一步完善添磚加瓦。






